各位老铁们,大家好,今天由我来为大家分享涂布法操作流程,以及三角涂布棒平板法步骤的相关问题知识,希望对大家有所帮助。如果可以帮助到大家,还望关注收藏下本站,您的支持是我们更大的动力,谢谢大家了哈,下面我们开始吧!
一、稀释涂布平板法操作步骤
1、根据目标菌株查找相关的培养信息(这个步骤尽量多采用几种培养方法),将不同的培养基分别配置成固体平板,将样本进行梯度稀释(如下图1所示)。
2、从10倍稀释的试管中吸取1ml稀释液,注入102倍稀释的试管中,重复第2步的混匀操作。依次类推,直达完成更后一支试管的稀释。注:移液管需要经过灭菌。操作时,试管口和移液管应在离火焰的1~2cm处。
3、稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。〖步骤〗将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。取少量菌液,滴加到培养基表面。
4、挑取单一个菌落, 一般再重复该法1-2次, 结合显微镜检测个体形态特征,便可得到真正的纯培养物。若样品稀释时能充分混匀,取样量和稀释倍数准确,则该法还可用于活菌数测定。
5、平板划线法:通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经数次划线后培养,可以分离到得到单菌落。
6、融化培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。 倒平板:待培养基冷却至50℃左右,按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m,平置,待凝固。
二、稀释涂布平板法包括哪两种操作
1、稀释涂布平板法 概念将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的标准菌落。
2、总结 稀释涂布平板法是一种简单、易行、成本低廉、适用范围广泛的微生物计数方法。在实验室准备工作、样品处理、制备平板、制备稀释液、涂布操作和计数和统计等方面需要严格遵守操作规程和标准操作程序,以确保实验结果的准确性和可靠性。
3、稀释平板法又分为平板表面涂布法和浇注平板法两种。无论哪种方法都是先将含菌样品用无菌水做一系列的10倍稀释,制成菌悬液,让其中的微生物细胞充分分散至单细胞,然后令其在平板培养基上生长并获得由单个细胞繁殖成的单菌落。
4、稀释涂布平板法具体操作如下:将分别盛有9ml水的6支试管灭菌,并按10到1到10到6的顺序进行编号。用移液试管吸取1ml培养的菌夜,注入10到1倍稀释的试管中。用手指轻压移夜管上的橡皮,吹吸三次。使菌液与水充分混匀。
5、不同的方法涂布平板法:将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量分散样品中的微生物细胞,使其以单细胞形式存在。然后取一定的稀释液和一定量的稀释液接种到平板上,使其在平板内的培养基中均匀分布。
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